菠菜乙醇酸氧化酶基因的克隆及表达

采用rt-pcr技术从菠菜总rna中分离扩增了乙醇酸氧化酶（go）基因的cdna序列，首先克隆到质粒pmd18t，进行了测序。然后将乙醇酸氧化酶的cdna分别亚克隆至质粒pthiohisc、ptigtrx、pbv220和pet-2b(+)，分别转化大肠杆菌dh5α和bl21（de3），并对重组乙醇酸氧化酶在大肠杆菌中的表达进行了研究。sdspage和酶活分析表明，菠菜乙醇酸氧化酶在e.colibl21(de3)（ptigtrxgo）和e.colibl21(de3)（pet-22b(+)go）里得到了高水平的表达，其中e.colibl21(de3)（pet-22b(+)go）的乙醇酸氧化酶活性较高。