谷氨酸棒状杆菌质粒pxz10145的限制酶图谱和嵌合质粒的组建

从谷氨酸棒状杆菌中已经分离到质粒pxzl0145，该质粒带有氯霉素抗性。通过电子显微镜和bamhi酵切后在1％琼脂糖凝胶电泳上测定pxzl0145质粒的大小为5．3kb。用bam—hi、psti、ecori、saii等限制酶进行酶切，并用bamhi+sa1i、bamhi+psti、psti+sali、ecori+psti、ecori+bamhi等双重酶切，得到pxzlol45限制性内切酶的图谱。证明bamhi和psti为单一酶切点。将pxzl0145与pbr322利用bamhi切点连接得到一嵌台质粒pxz34。这一质粒能在大肠杆菌中复制，在大肠杆菌中表现有氨苄青霉素和氯霉素的抗性，但是抗氯霉素的能力大大降低，只抗2y／ml。