苏氨酸操纵子的克隆与诱变

本文报道用hindi+bamhi双酶切方法，从大肠杆菌k12的野生型菌株染色体上克隆苏氮酸操纵子的三个基因(thra，thrb和thrc)到载体pbr322上，在合成培养基上筛选带thr操纵子的转化子。所得杂种质粒pth1经羟胺体外诱变，筛选得到抗氨基酸类似物a-氧基-β-羟基戊酸(ahv)的突变质粒pth2和pth3，在宿主大肠杆菌c600中产苏氨酸最比初级克隆株高20倍以上，在解除天冬氨酸激酶—高丝氨酸脱氢酶(aki—hdi)反馈抑制的宿主大肠杆菌a56—121中产苏氨酸量可达11g／l，比初级克隆株大肠杆菌c600(pthl)高100倍以上。