牛生长激素cdna的分子克隆

我们克隆了与牛生长激素poly(a)+rna互补的dna(cdna)。首先从小牛垂体中提纯总的pply(a)+rna，用amv逆转录酶合成单链cdna，以单链cdna为模板合成双链cdna，用多聚g及多聚c谱尾法将双链cdna克隆到pbr322质粒的psti位点上，构建成牛垂体poiy(a)+rna的cdna文库。以牛生长激素基因为探针，筛选出7个阳性菌落，经电泳鉴定有两个菌落(1号和2号)含有大于500bp的插入片段。1号克隆经酶切图谱、southetnblot杂交及序列分析证实含有牛生长激素的编码序列。