琥珀酸弧菌l-天门冬酰胺酶基因的初级克隆和表达

本文以表达型噬菌体λgtll为载体，以及125i标记的放射免疫抗体为探针，从ecdri酶切的琥珀酸弧菌(vyibrtosuccinogenes)染色体dna片段中克隆得到携带天门冬酰胺酶基因的目的片段，在宿主菌e．coily1090中得到表达。经酶解和凝胶电泳分析表明该插入dna片段的分子量为5．8kb．重组dna感染另一宿主菌e．coliyl089后所产生的酶蛋白具有l-天门冬酰胺酶活力。用重组dna(λgt11-as8)为探针进行southerndna杂交，琥珀酸弧菌染色体dna的ec0ri酶切片段中，出现一条位置在5．8kb处的杂交带，证明我们克隆到的携带l-天门冬酰胺酶基因的目的片段来自琥珀酸弧菌。