杜氏盐藻psab基因cdna的克隆与序列分析

根据真核生物莱茵衣藻(chlamydomonasreinhardtii)、chlamydomonasmoewusii、chlorellavulgaris以及mesostigmaviride的psab基因的氨基酸高度保守序列，设计一对简并引物，利用trizol试剂提取杜氏盐藻（dunaliellasalina）细胞的总rna，通过rt-pcr，得到的一段长为1.8kb左右的cdna片段。pcr产物经t-a克隆并测序分析以及测序结果推导成氨基酸序列进行同源性比较，表明所克隆的1815bp序列为杜氏盐藻psabcdna片段，genbank收录号为ay820754。根据已经得到的psab序列推导成氨基酸序列与一些已知物种的psab基因相比较，同源性分别为chlamydomonasreinhardtii92%，chlamydomonasmoewusii91%，chlorellavulgaris86%,mesostigmaviride85%，physcomitrellapatenssubsp.patens85%,nephroselmisolivacea84%。据此可推断本实验中所克隆的序列为杜氏盐藻psabcdna序列。