|
生物工程学报 2013
9r穿膜肽可增强p53抗肿瘤效果, PP. 955-964 Keywords: p53,cpps-p53,穿膜肽,细胞凋亡 Abstract: 为解决p53蛋白难以进入细胞内部发挥治疗作用的瓶颈难题。将p53基因融合插入带有9个精氨酸作为穿膜肽的表达载体中表达融合蛋白cpps-p53,并与没有穿膜肽的p53蛋白进行比较,利用westernblotting方法检测蛋白的表达情况,mtt及annexinv/pi双染法检测细胞生长抑制率及细胞凋亡率。westernblotting检测表明已成功在原核表达系统中表达融合蛋白cpps-p53和p53蛋白,且蛋白纯度均已达到90%以上;mtt检测表明,p53蛋白对肿瘤细胞的生长虽有一定的抑制作用,但融合蛋白cpps-p53与之相比,对肿瘤细胞生长的抑制效果显著增强,细胞生长抑制率有明显的提升,并且细胞生长抑制率呈现剂量依赖性;annexinv/pi双染检测细胞凋亡情况也表明p53虽可以在一定程度上诱导肿瘤细胞的凋亡,但与p53蛋白相比较,融合蛋白cpps-p53诱导的凋亡细胞明显增加,凋亡率是p53蛋白的2~3倍。由此说明在抑制肿瘤细胞的生长和诱导细胞凋亡方面,cpps-p53比没有穿膜肽的p53蛋白的效果更显著
|