细胞酶联反应法(cell-ela)测定特异结合u87-egfrvⅲ细胞的适配子的亲和力

通过细胞-指数级富集的配基系统进化(cellbasedsystematicevolutionofligandsbyexponentialenrichment，cell-selex)方法从随机文库中筛选得到与稳定过表达人表皮生长因子受体ⅲ型突变体(epidermalgrowthfactorreceptorvariantⅲ，egfrvⅲ)的胶质瘤细胞u87细胞株(u87-egfrvⅲ)特异结合的dna适配子。以u87-egfrvⅲ细胞作为检测对象，筛选到的适配子a15作为检测分子，建立一种细胞酶联反应(cellenzyme-linkedassay，cell-ela)方法测定适配子的亲和力，并用egfr抗体作为对照来比较此种dna适配子的亲和力。结果显示，所测定的dna适配子a15的解离平衡常数(equilibriumdissociationconstants，kd)小于100nmol/l，对u87-egfrvⅲ细胞的结合能力与抗体相似。cell-ela法可较方便地用于cell-selex中适配子亲和力的测定。