应用纤维素结合域标签构建谷氨酸棒状杆菌表达系统

为优化谷氨酸棒状杆菌表达系统的纯化工艺，合成里氏木霉的cbd基因，将其与谷氨酸棒状杆菌分泌表达载体pxmj19-sp连接，构建以cbd为纯化标签的重组载体pxmj19-sp-cbd。在该载体中插入gfp基因并转化至谷氨酸棒状杆菌，可获得分泌表达融合蛋白gfp-cbd的重组菌。该菌经iptg诱导后的发酵液在紫外灯下显示强烈的绿色荧光，重组蛋白的分泌表达量达200mg/l。利用cbd标签对纤维素柱的可逆性吸附，可直接对谷氨酸棒状杆菌分泌到培养基中的重组蛋白进行纯化，从而简化工艺和降低成本，为工业化大生产奠定基础。