|
生物工程学报 2015
flightlessⅰ与核质转运蛋白importinβ及核孔蛋白nup88的相互作用DOI: 10.13345/j.cjb.150047, PP. 1247-1254 Keywords: 分子生物学,rna转运,gst-pull,down,免疫共沉淀,flightlessⅰ,importin,β,nup88 Abstract: fightlessi(flii)是一个在肿瘤中高表达的蛋白,前期研究提示flii可能参与核质转运过程,为鉴定flii是否与核膜结合蛋白相互作用,构建gst-flii、gst-lrr融合蛋白重组质粒并转化至大肠杆菌rosetta进行诱导表达,使用gst琼脂糖珠进行融合蛋白的纯化。通过sds-page对纯化蛋白进行验证之后,利用gst-pulldown及免疫共沉淀技术证明了flii与importinβ、nup88蛋白的相互作用,并鉴定flii上的lrr结构域为相互作用区域。研究结果提示flii可能参与了importinβ的部分生物学作用,为进一步分析flii与importinβ、nup88的生物学功能奠定了基础。
|