猪esrrb启动子克隆及其调控活性检测

esrrb(estrogenrelatedreceptorβ)属于雌激素受体家族，是一类在胚胎早期外胚层细胞中表达并对干细胞多能性维持起重要作用的基因。为了探索猪esrrb的表达和转录调控机制，克隆了3.3kbesrrb启动子片段，构建了相应的报告载体。并将报告载体分别转染293t人胚肾细胞、hela人宫颈癌细胞和小鼠c2c12成肌细胞。通过tfsearch和jasper方法对esrrb启动子潜在的转录调控位点进行分析，发现该启动子上有smad、stat3、myc、klf4等多能转录因子的结合位点。将相应的转录因子与esrrb启动子共转染，并检测报告基因荧光素酶的活性。结果显示猪esrrb启动子具有明显的组织特异性调控，同时smad对esrrb启动子活性有较明显的调控作用。进一步对3.3kb片段进行了一系列的缺失，发现猪esrrb核心区域位于5′上游的?25bp和?269bp之间。研究结果表明猪esrrb启动子上潜在的转录因子结合位点及启动子核心区域是参与调控esrrb表达的重要序列。