重组大肠杆菌利用蔗糖及糖蜜发酵生产丁二酸

富含蔗糖的甘蔗糖蜜可作为制备丁二酸的廉价原料。然而生产丁二酸的潜力菌株大肠杆菌escherichiacoliafp111不能代谢蔗糖。为了使其具有蔗糖代谢能力，将e.coliw中非pts蔗糖利用系统蔗糖通透酶的编码基因cscb，果糖激酶的编码基因csck和蔗糖水解酶的编码基因csca克隆并表达到afp111中，获得重组菌株afp111/pmd19t-cscbka。经厌氧发酵验证，重组菌株72h消耗20g/l蔗糖，丁二酸产量达到12g/l。在3l发酵罐中采用有氧阶段培养菌体、厌氧阶段发酵的两阶段发酵方式，厌氧发酵30h，重组菌株以蔗糖和糖蜜为碳源丁二酸产量分别为34g/l和30g/l。结果表明，通过外源引入非pts蔗糖利用系统，重组菌株具有较强的代谢蔗糖生长及合成丁二酸的能力，并且能够利用廉价糖蜜发酵制备丁二酸。