青花菜雄性不育相关基因bodhar的克隆与表达分析

以一个与甘蓝显性核不育相关的差异表达片段的序列为信息探针，通过在ncbi与tair网站数据库中进行同源est序列搜索，经人工拼接、rt-pcr、pcr克隆与序列分析，获得了青花菜脱氢抗坏血酸还原酶dhardehydroascorbatereductase基因的cdna与dna全长序列，命名为bodhar。并利用双链接头介导pcr的染色体步行技术（genomewalking）克隆了其上游644bp的5′端序列。所获的bodhar基因全长1486bp，存在两个内含子，dna编码区序列633bp，编码210个氨基酸；序列分析表明：bodhar与同源基因at1g195701cdna序列有82.3%的一致性，推导的氨基酸序列有79.6%的一致性；编码的水溶性蛋白存在多个磷酸化位点；5′端上游区存在明显的转录调控序列。半定量rt-pcr结果表明：bodhar在可育系花蕾中的表达量明显高于不育系花蕾，在花药中的表达明显高于其它部位。