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生物工程学报 2006
fmdvvp1基因与hsp70基因在毕赤酵母中的融合表达及免疫特性Keywords: o型口蹄疫病毒,vp1基因,hsp70,毕赤酵母,融合表达 Abstract: 利用毕赤酵母系统对o型口蹄疫病毒vp1基因与结核杆菌hsp70基因进行融合表达,并检测此融合蛋白对小鼠细胞免疫和体液免疫的影响。将人工合成的o型口蹄疫病毒vp1基因与结核杆菌hsp70基因克隆入酵母表达载体ppiczαa中,以电穿孔法转化酵母菌x_33,用zeocin+ypds平板筛选重组子,经甲醇诱导表达后,sds-page和免疫印迹分析表达产物。以皮下接种的方式给小鼠进行3次免疫,同时设两组对照,分别免疫pbs和常规灭活疫苗,然后通过mtt法和elisa分别检测淋巴细胞的增殖情况和抗体水平。结果表明融合蛋白既能诱导细胞免疫应答又能诱导体液免疫应答,其诱导产生的抗体水平略低于常规灭活疫苗,而细胞免疫水平则高于后者。
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