电穿孔介导小干扰rna高效转染小鼠附植前胚胎

使用cy3标记的阴性对照小干扰rna(sirna)转染小鼠附植前胚胎，建立向小鼠附植前胚胎导入sirna的电穿孔方法。通过控制透明带弱化程度、电压、脉冲时间和脉冲次数等条件，采用不同参数组合并结合使用不同介质作为电转缓冲液将cy3标记的阴性对照sirna转染小鼠附植前胚胎。在荧光倒置显微镜下，观察胚胎的存活率、sirna转染率以及阳性转染存活胚胎的囊胚发育率。结果显示小鼠附植前胚胎在使用台氏液消化胚胎透明带10s后，以opti-mem作为电转缓冲液，电穿孔参数设置为30v，1ms，3次的条件下取