家蚕表达人表皮生长因子gp67信号肽融合蛋白及生物活性的研究

人表皮生长因子(hegf),一种由53个氨基酸残基组成的单链多肽,具有广阔的应用前景。本文主要探讨家蚕表达人表皮生长因子gp67信号肽融合蛋白的生物活性。采用家蚕杆状病毒表达系统来表达该信号肽融合蛋白。构建了重组质粒pbacpaks-hegf,将该重组质粒与线性化病毒bm-bacpak6dna共转染家蚕细胞,筛选获得重组病毒vbacpak-segf,用vbacpak-segf感染家蚕bmn细胞和五龄蚕,westernblot检测表明在家蚕细胞、五岭幼虫的血淋巴和蛹中均有约12kd的目的蛋白表达。elisa检测发现在家蚕细胞中的表达量为23mg/106细胞,五龄幼虫中的表达量可达到82mg/ml血淋巴。利用小鼠成纤维细胞balb/c3t3分析家蚕表达的hegf信号肽融合蛋白的生物活性,结果表明表达产物能显著促进balb/c3t3细胞的增值。另外,研究还发现hegf信号肽融合蛋白可使新生icr小鼠体重增加,睁眼和萌齿时间提前。本研究为进一步开发利用家蚕表达的hegf提供理论基础。