奶牛瘤胃微生物元基因组文库中脂肪酶的筛选与酶学性质

利用含有三油酸甘油酯的脂肪酶选择性筛选培养基,从奶牛瘤胃微生物元基因组文库15360个克隆中,筛选得到了18个脂肪酶阳性克隆,其插入片段大约为60kb,并且各个克隆的插入片段各不一样。利用p-npp法对脂肪酶克隆的脂肪酶活性分析,表明均具有大小不等的脂肪酶活性。底物特异性分析表明lipase6、lipase7和lipase8分别对c16底物(对硝基苯棕榈酸酯)、c12底物(对硝基苯月桂酸酯)和c16底物(对硝基苯棕榈酸酯)水解能力最强。lipase6、lipase7、lipase8的脂肪酶最适ph为7.5;lipase8的脂肪酶活性半衰期随反应温度的升高而缩短,70oc时能达到30min。本研究所筛选的脂肪酶具有不同的底物特异性和较好的热稳定性,这对于工业化生产具有一定的应用潜力。