内生菌pseudomonassp.g5phzir基因的克隆与表达

假单胞菌菌株g5是分离自香菜(coriandrumsativuml.)茎内的一株内生菌,经biolog系统分析其底物利用图谱,初步鉴定为桔黄假单胞菌pseudomonasaurantiaca。大量研究已表明许多革兰氏阴性细菌应用群体感应系统,通过感应扩散性小信号分子―乙酰基高丝氨酸内酯(n-acylhomoserinelactones,ahls),以种群密度依赖的方式调控基因表达,控制植物相关细菌的多种表型。本研究组合应用ahls检测菌株chromobacteriumviolaceumcv026和薄层层析分析,初步检测出菌株g5可产生几种可检测水平的ahls信号分子,其中以n-hexanoyl-homoserinelactone(c6-hsl,hhl)为主,迁移率rf值为0.4。进一步克隆和测序了该菌株中由phzi和phzr组成的群体感应quorumsensing系统的编码基因phzir,并在大肠杆菌中异源表达了ahls信号分子合成酶基因phzi。序列和系统进化分析表明它们与假单胞菌属其他的phzir基因有高度同源性和进化上的保守性。