番茄lehsp23.8启动子的热诱导表达调控序列鉴定

番茄线粒体小分子热激蛋白(lehsp23.8)启动子是典型的热诱导启动子。为了研究热激条件下该启动子的调控序列,本研究将不同长度的lehsp23.8启动子序列与gus基因融合,构建5￠缺失植物表达载体。然后用农杆菌介导法转化烟草,pcr及southernblotting结果表明融合基因已经整合到烟草基因组中。gus组织化学染色结果表明:不同长度lehsp23.8启动子转基因植株热激处理后,在幼苗根、茎、叶以及花和果实中均表现出gus活性,只是染色强弱有差异。叶片中gus荧光活性测定结果表明:在热激处理条件下,565bp的lehsp23.8启动子介导的gus表达最强;而255bp的lehsp23.8启动子介导的gus表达最弱。说明lehsp23.8启动子中255bp的序列即能满足该启动子的热激表达,-565bp~-255bp之间存在明显的增强子元件,而-871bp~-565bp之间的片段具有一定的抑制作用。