asia1型口蹄疫病毒胶体金免疫层析检测方法的建立

为建立一种快速、简便、灵敏检测asia1型口蹄疫病毒的胶体金免疫层析方法(gica)。本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗asia1型口蹄疫病毒的单克隆抗体,将该标记物与羊抗豚鼠igg分别包被在硝酸纤维素膜(nitrocellulosemembrane)上,作为检测带和质控带。经条件优化,组装成检测asia1型口蹄疫的诊断试纸条。用该试纸条分别对a、o、c和asia1型口蹄疫病毒抗原以及猪水泡病病毒抗原等87份样品进行了检测,发现该试纸条不与口蹄疫病毒a、o、c型以及猪水泡病病毒抗原发生反应,特异性良好。用该试纸条对口蹄疫细胞毒(tcid50为6.25)的10倍系列稀释液进行了检测,最低可以检测到大约10-4。该试纸条与其他传统诊断方法的符合率为98.8%。初步实验确定该试纸条在4oc下可保存3个月、37oc和室温下大概可保存1周左右。该试纸条是一种快速、灵敏、特异的fmd抗原检测方法,对现场检测具有一定实用价值。