内蒙古白绒山羊erk2基因的克隆及表达模式分析

旨在克隆内蒙古白绒山羊erk2基因cdna并分析其基本表达模式。采用rt-pcr方法克隆白绒山羊erk2基因cdna。通过在线软件blast进行核酸序列分析，用smart与psite进行氨基酸序列分析。定量rt-pcr检测erk2基因在绒山羊组织中的表达特异性。免疫组化法检测绒山羊睾丸中erk2表达。克隆到的内蒙古白绒山羊erk2基因cdna片段(genbankaccessionno.jx569765)长1083bp，包含了编码360个氨基酸残基的全长orf，氨基酸序列与牛的erk2(bostaurusbc133588.1)同源性为100％。smart分析表明，orf编码的蛋白包含了活化位点“tey”及具有丝氨酸/苏氨酸激酶催化活性的s-tkc结构域。psite分析表明，含2个n-糖基化位点、1个依赖于camp/cgmp的蛋白激酶磷酸化位点、3个蛋白激酶c磷酸化位点、5个酪蛋白激酶ⅱ磷酸化位点、2个n-豆蔻酰化位点、2个异戊二烯基结合区(caaxbox)、7个微体羧基端靶向信号、2个蛋白激酶atp结合区标记及一个丝/苏氨酸蛋白激酶活性区域标记。psort(k-nnprediction)程序预测其定位于细胞质中。定量rt-pcr分析显示erk2基因mrna丰度在心脏、皮肤以及乳腺组织中mrna丰度较高，脾、肾中的表达相对较低。在睾丸中检测到erk2蛋白表达。