大肠杆菌不耐热肠毒素的表达及其纯化保存策略

编码完整大肠杆菌不耐热肠毒素(lt)的基因被引入pet11c形成pet11-lt，该质粒在e.colibl21(de3)中得到较高效率的表达，约46mg/l。用d(+)immobilizedgalactose柱可以在很宽的ph范围(ph7.3～10.4)内用多种方法对lt进行纯化且保持其结构完整。溶于tean(ph7.3)或碳酸盐缓冲液(ph10.4)的lt，冻干后保存于4℃，可长久保持其完整结构，此为保存lt的较好策略。与gm1结合实验、cho细胞及patentmouse毒性检测实验证明纯化的lt具有生物学活性。