高通量筛选瞬时受体势v3通道调节剂细胞模型的建立

为发现trpv3调节剂,通过荧光成像分析系统检测钙浓度,建立高通量筛选瞬时受体势v3通道(transientreceptorpotentialv3,trpv3)调节剂的细胞模型。将trpv3表达载体转染人胚肾(hek-293)细胞,抗生素筛选稳定表达trpv3的细胞系,选取trpv3特异性调节剂作用于细胞模型,应用荧光成像分析系统测钙实验检测trpv3高表达细胞系药理学特征,同时优化实验条件,考察模型的稳定性,并评估应用于96孔板及384孔板进行高通量筛选的可靠性及准确性。获得了高表达trpv3的hek-293稳定细胞系,通过trpv3离子通道调节的钙流信号与trpv3特异性调节剂成剂量依赖关系,优化得到了最适筛选条件,该模型稳定,灵敏,通过z因子及spiking检测,完全符合高通量筛选需求。利用此细胞模型通过检测钙信号可筛选trpv3调节剂。