重组葡激酶和水蛭素融合蛋白的血栓靶向性机制

为解释以凝血因子xa（fxa）的识别序列为连接肽的葡激酶和水蛭素的融合蛋白（命名为sfh）在体内的强溶栓和低出血的特征，研究分析了sfh的两个血栓靶向性作用机理。首先采用elisa和免疫组化的方法在体外分析了由水蛭素游离的c末端赋予的sfh对血栓的靶向性，结果显示sfh对凝血酶和富含凝血酶的血栓具有更高的亲和力。为阐明sfh抗凝活性在血栓部位的靶向性释放，构建表达了仅在水蛭素n末端连接fxa识别序列的水蛭素衍生物（命名为fh）。体外试验结果表明完整的fh无抗凝活性，在体内fh可以发挥抗栓作用，且出血副作用较低，这些结果说明fxa的识别序列可以封闭水蛭素的抗凝活性，在体内fh可以由于fxa的成功裂解而释放其抗凝活性，且其抗凝活性可能仅局限于血栓局部。这就间接说明了sfh的抗凝活性可以在血栓局部进行靶向性释放。以上两个血栓靶向性作用机理是sfh在体内发挥更高溶栓效率和降低出血副作用的重要机制。