萝卜叶绿体dna花粉育性特异片段的定位

本实验采用萝卜细胞质雄性不育系401a及其同核保持系401b为材料，利用bamhi、ecori、bgli和hindⅱ四种内切酶酶解其叶绿体：dna。除hindⅱ外，其余三种内切酶电泳图谱中均显示两系之间的明显差异。将bamhi的5个差异片段分别与载体pbr322进行体外连接，获得4种重组体克隆。利用3种膜蛋白质基因探针，分别与两系的叶绿体dna杂交，杂交均未出现在差异片段所在部位，这说明，两系之间的差别可能与这3种基因无关。将重组体质粒分别与p700叶绿素a脱辅基蛋白质基因探针及反向重复区内rrna基因区探针杂交，结果表明，有3种重组体质粒所携带的差异片段与rrna基因探针在杂交中显示出明显的阳性反应。也就是说，这3个差异片段均位于rrna基因所在的叶绿体基因组的反向重复区中。