用dna重组技术获得乙型肝炎病毒e抗原及其在临床检测中的应用

hbeag和抗－hbe是乙型肝炎的经典标志物。hbeag基因与hbcag基因在dnac区上相重叠。为要获得重组dna衍生的hbeag，本文从adw2亚型hbv3．2kb全长dna上切取带有hbc基因的bamhi-ecori片段，用bal3l和hpai酶处理产生一系列长度不同的片段，与载体pur222和puc18构成不同的重组质粒，转化到大肠杆菌。通过平板筛选、质粒酶切图谱和抗原抗体反应等筛到高效表达hbeag的转化株yg30l和yg302，中和试验证明了重组hbeag的血清学特异性。用凝胶过滤、离子交换层析和亲和层析对其进行提纯并用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合western印迹法进行纯度鉴定、含量分析和分子量测定。重组hbeag制品具有高活性、稳定和安全等特点，实验证明它可以代替血源hbeag制成酶联药盒用于乙肝诊断检测。