吸水链霉菌应城变种10—22中一个复制子的克隆和基本复制区的定位

利用由pbr322衍生的链霉菌复制子探针载体pij2703，从吸水链霉菌应城变种菌株10－22中克隆了一段１3kb的可以自主复制的dna，制作了携带这段dna的杂合质粒p}iz54的限制酶图谱。利用缺失、次级克隆等方法将基本复制区确定在2．86kb的范围内。用外切酶ⅲ顺序缺失法不仅进一步确证了基本复制区的位置，而且将其缩小到2kb的范围内。同时，在上述试验过程中、还组建了一系列既可在大肠杆菌、又可在变铅青链霉菌中复制的双功能质粒，其中有些质粒是有用的穿梭载体。