ad-il-24对mg-63人骨肉瘤细胞抑癌效应的体内外实验

本研究旨在分析腺病毒携带的il-24基因在体内外对人骨肉瘤细胞生长抑制效应及其分子机制。将ad-il-24重组腺病毒感染mg-63细胞,用荧光显微镜、rt-pcr法检测il-24在mg-63细胞中的转录和表达;mtt法、流式细胞技术和hoechst染色法检测il-24基因的表达对mg-63细胞的生长抑制和凋亡效应;半定量rt-pcr法检测il-24基因的表达对mg-63细胞中的bcl-2、bax、caspase-3相关基因表达的影响。用ad-il-24重组腺病毒在mg-63骨肉瘤荷瘤裸鼠的瘤体内进行注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重。并通过免疫组化法检测bcl-2、bax、caspase-3等与细胞凋亡相关因子的表达。结果表明ad-il-24重组腺病毒感染mg-63细胞后,能明显抑制mg-63细胞增殖,并能通过上调细胞中bax、caspase-3和下调bcl-2基因表达,诱导细胞凋亡,呈现出典型细胞凋亡形态学变化。ad-il-24重组腺病毒瘤内注射mg-63裸鼠荷瘤骨肉瘤移植瘤后,能显著抑制肿瘤生长,瘤重的抑制率可达52%,免疫组化结果显示ad-il-24重组腺病毒能明显上调与细胞凋亡相关因子bax和caspase-3的表达和下调bcl-2和cd34的表达。本研究结果显示腺病毒介导的il-24基因在体内外均可明显抑制mg-63人骨肉瘤细胞的生长,诱导其凋亡,其机制可能与下调bcl-2,上调bax、caspase-3的基因表达水平有关,由此为骨肉瘤的基因治疗提供实验依据。