牛凝乳酶原基因在大肠杆菌中的表达

以tac为启动子构建了牛凝乳酶原b基因表达质粒ptaac，转化大肠杆菌jml05，对数生长期加入o．1mmo1／liptg能明显诱导凝乳酶原的产生。基因表达除受iptg的影响外，也受温度的调节控制。在30℃培养，iptg存在时，凝乳酶原产量极低j在42℃无iptg的条件下，基因也能表达。按电泳扫描计算凝乳酶原蛋白占细胞可溶性总蛋白量的12～19％，按elisa法测定凝乳酶原产量为80～100mg／l，经变性、复性及酸化有活性的凝乳酶产量为14—20mg/l。