抗人pai－1单克隆抗体制备、鉴定和应用

以重组pai－（rpai－1)为抗原，通过杂交瘤技术获得6株阳性杂交瘤细胞(apl、ap2、ap3、ap4、ap5和ap6)，并用spa亲和层析纯化了抗pal－1单克隆抗体(mcab)。所有mcab均能识别rpai和天然pai－1，腹水滴度均为10　6以上。6种mcab对pai－1亲和常数在3．45×107--1.05×109mol／l之间。ap2、ap3mcab能完全抑制pai－1活性，ap4、ap和ap6只能部分抑制pai－1活性，apl则不抑制pai-1活性。6种mcab中只有apl、ap4和ap5能识别pal－1／t－pa复合物。利用apl、ap3、和ap4mcab制备免疫亲和柱一步纯化hepg2细胞分泌的pai－1，纯度大于98％，回收率92％，纯化倍数51倍。利用抗pai－1mcab建立了夹心法elisa，测定了人血浆pai－1水平，正常人血浆pai－1平均含量(x士d)为24．7±7．75ng／ml。