番茄多聚半乳糖醛酸酶cdna的克隆及其对番茄中pg表达的反义抑制

通过pcr扩增获得了包含多聚半乳糖醛酸酶(pg)全部阅读框架的1.5kbcdna，经限制酶酶谱和部分序列分析鉴定无误后，将其以反方向插入含两个增强子的35s启动子和nos3＇端之间，构建成表达pg反义rna的双元载体，经农杆菌途径转化番茄品种“丽春”，获得了60株抗卡那霉素再生植株，经pcr检测，证明有2／3的再生植株有外源pg基因导入，成熟果实的pg粗提液的sds—page分析表明：若干株系中pg蛋白量较对照有不同程度的下降。pg活性亦同步下降，其中一个株系3＃，pg酶活下降了93%。这些结果表明外源pg基因的反方向导入有效地抑制了内源pg基因的表达。