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生物工程学报 2008
整合猪繁殖与呼吸综合征病毒gp5蛋白的重组鼠白血病病毒特性, PP. 780-785 Keywords: 鼠白血病病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,gp5基因,假病毒 Abstract: 通过反转录-聚合酶链式反应(rt-pcr)扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒完整的gp5基因并进行了克隆与鉴定。序列测定结果与已经登陆genbank的ef488048高致病性江西株比对分析表明碱基同源性达98.7%。构建含gp5基因的真核表达载体pcdna-gp5,通过与鼠白血病病毒(mulv)假病毒构建体系的两种质粒phit60和phit111共转染人胚肾细胞293t,48h后收集假病毒上清,超离后通过western-blot证明gp5蛋白在假型病毒颗粒表面存在,表明gp5蛋白被整合到此假型病毒粒子表面。通过感染293t、mark-145不同的靶细胞,证实所构建的假型病毒粒子具有感染性。成功构建了具有感染性的mulv-gp5假病毒体系,为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒侵入细胞的机理及其组织嗜性的变异提供一种新方法。
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