fmdv整联蛋白受体b1亚基的克隆及其配体黏附区多抗的制备

采用rt-pcr技术从牛气管组织扩增出2400bp的b1基因,回收纯化连入pgem-t载体,测序。用expasy软件对b1基因的抗原性进行分析,选取胞外区334~861bp的配体结合区与6×his融合,在大肠杆菌中大规模诱导表达,并经ni2+亲和柱层析纯化。通过sds-page鉴定后,应用纯化蛋白免疫新西兰家兔,获得效价在1:12800以上的多抗,westernblotting鉴定表明此抗体可特异性的与表达的融合蛋白作用。