一种来源于leifsoniashinshuensisdicp16菌体的b-d-木糖苷酶的分离纯化及其性质

采用盐析、de52、q-sepharosefastflow阴离子交换层析、toyopearlbutyl650c疏水层析以及sephacryls-300hr凝胶过滤层析联用的方法,从leifsoniashinshuensisdicp16菌体中纯化出一种b-木糖苷酶。分离后该酶在sds-page上呈单一蛋白质条带,通过sds-page和凝胶过滤层析法,测得该酶是一个由两个分子量约为91kd的相同亚基组成的同源二聚体。其水解对硝基苯酚木糖苷(pnpx)的最适反应温度为55°c,ph值为7.0。该木糖苷酶在45°c以下,ph6.0~11.0之间具有很好的稳定性。在45°c,ph值为7.0的条件下,水解pnpx的km,vmax分别为1.04mmol/l,0.095mmol/(min·mg)。研究不同的金属离子对该酶的活性影响,发现fe2+和cu2+是很强的抑制剂。通过对天然木糖苷化合物的水解测试,发现该酶可以水解人参皂苷rb3的木糖基,产生人参皂苷rd,却不能水解紫杉烷木糖苷的木糖基。