猪羊水干细胞特异向跳动心肌细胞诱导分化

为了筛选并建立一种由猪羊水干细胞向心肌细胞分化的有效方法，以猪羊水干细胞为研究对象，以5-氮胞苷(5-aza)和维生素c(vc)为诱导剂，对猪羊水干细胞形成的类胚体(ebs)进行诱导分化。应用免疫荧光、rt-pcr、透射电镜技术检测跳动细胞团中心肌特异性标记的表达情况。结果显示，在猪羊水干细胞形成的类胚体中加入心肌细胞诱导剂，10d后即见到节律性跳动的细胞团，t检验发现0.1mmol/lvc加5μmol/l5-aza联合诱导组的诱导效率最高，达33％。免疫荧光结果显示跳动心肌细胞团表达细胞骨架蛋白α-actin和肌钙蛋白tnni3。rt-pcr检测跳动心肌细胞团，发现心肌细胞特异性标记分子tbx5、gata4、α-mhc、tnni3均呈阳性表达。借助透射电镜观察诱导后的跳动样细胞团，能清晰可见其中的肌丝、糖原粒、糖原池等结构。说明5-氮胞苷和维生素c可以促进猪羊水干细胞向心肌细胞的诱导分化。