植物甜蛋白des-pglu1-brazzein的密码子优化及其在毕氏酵母中的表达

根据甜蛋白des-pglu1-brazzein的成熟区氨基酸序列，按照酵母密码子的偏好优化其编码序列，合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列，经连接、pcr扩增后得到了179bp的des-pglu1-brazzein编码序列，插入到ppic9k载体中，构建了重组表达载体ppic9k-bra。经酶切、电击转化到毕赤酵母菌gs115中。酵母工程菌株经筛选鉴定后诱导表达，目的蛋白的表达量约占上清总蛋白的51.6％，分离纯化后的des-pglu1-brazzein具有一定的甜度。