草鱼胶原凝集素基因的克隆及其功能分析

从草鱼(ctenopharyngodonidella)肝肾cdna文库中克隆得到胶原凝集素基因。草鱼胶原凝集素全长cdna为1128bp，其中5?非编码区229bp，3?非翻译区104bp，最大开放阅读框为795bp，编码264个氨基酸。系统进化分析表明草鱼胶原凝集素与斑马鱼的亲缘关系最近。根据草鱼胶原凝集素序列特征，克隆了包含糖基识别域(crd)的cdna，并进行原核表达、纯化获得其重组蛋白pcrd。进行pcrd与6种细菌的凝集和糖抑制实验，结果表明半乳糖、葡萄糖、甘露糖和麦芽糖4种糖都会使pcrd与嗜水气单胞菌的凝集明显下降甚至极大地干扰凝集;麦芽糖使金黄色葡萄球菌的凝集明显下降，而肽聚糖和甘露糖会使凝集受到抑制;此外，pcrd的凝集反应不依赖ca2+。