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生物工程学报 2011
支气管败血波氏杆菌皮肤坏死毒素的重组表达及其生物学特性, PP. 1722-1728 Keywords: 支气管败血波氏杆菌,皮肤坏死毒素,dnt基因 Abstract: 皮肤坏死毒素(dnt)是支气管败血波氏杆菌的主要致病因子之一。通过pcr分段扩增和克隆获得了全长4356bp的dnt基因,并利用pet-28a/bl21系统对其进行了融合表达。westernblotting检测结果表明,表达产物具有良好的免疫学活性。使用his-bandpurificationkit纯化试剂盒纯化后,得到纯度为93.2%的融合蛋白his6-dnt。在乳鼠皮肤坏死试验中,表达产物his6-dnt和天然dnt均能导致乳鼠皮肤产生坏死性病变。在乳鼠皮肤坏死阻断试验中,兔抗his6-dnt血清能中和天然dnt使其失去对乳鼠的皮肤坏死毒性。试验结果表明,重组蛋白具有天然dnt的生物学毒性和免疫原性,所产生的抗体具有中和活性。文中所获得的重组dnt蛋白具有良好的生物学活性,为dnt的结构和功能研究奠定基础。
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