il-1018-57-pe40高效表达、纯化及细胞活性之研究

以il-10的功能短肽（40肽，即il-10第18号至57号氨基酸）为导向部分与pe40（绿脓杆菌外毒素除去受体结合区后的剩余部分）融合分别构建了il-1018-57-pe40的胞质和胞周质表达质粒，其中，il-1018-57-pe40在rosettablue(de3)中以高效胞质可溶形式表达，在bl21（de3）plyss中以胞周质分泌形式表达；表达宿主菌rosettablue(de3)超声波破碎后，依次通过硫酸铵盐析、疏水层析、铜离子亲和层析、阴离子交换层析纯化后，得96%重组毒素纯品；细胞活性实验、细胞elisa和荧光标记实验表明，构建的il-1018-57-pe40符合免疫毒素的作用机理。因此，该实验为pe免疫毒素的规模制备和纯化做了一定的有益的探索。