猪胸膜肺炎放线杆菌血清1型rtx毒素i的n-端表达多肽具有良好的免疫原性

apxi外毒素是猪胸膜肺炎放线杆菌（app）最重要的毒力因子，为了研究其n端多肽的免疫原性，分别将apxia基因的全长编码区（apxia,3146bp）及其5′端1140bp的片段（apxia5）克隆到原核表达载体pet-28a，经iptg诱导后在大肠杆菌中实现了表达，表达产物apxia和apxian均以包涵体的形式存在，westernblot检测证实两种表达产物均具有免疫反应性。将纯化的重组蛋白（rapxia和rapxian）和提取的天然毒素apxi（napxi）分别经腹腔免疫balb/c小鼠，于免疫前、免疫2周和4周后分别检测了elisa抗体和毒素中和抗体水平，结果表明，rapxian免疫组的elisa抗体显著低于rapxia免疫组和napxi免疫组，但rapxian免疫组血清中和试验中测定的溶血素单位与rapxia及天然napxi免疫组没有显著差异。第二次免疫2周后，用1个ld50的app血清1型j101株和2型标准菌株攻击试验动物，rapxian免疫组对血清1型和2型菌株的保护率分别为80％和100％。