通过n端替换提高木聚糖酶的热稳定性

以来源于thermomonosporafusca的耐高温木聚糖酶tfxa和来源于streptomycesolivaceoviridis的高比活木聚糖酶xynb为亲本，构建出耐热高比活融合木聚糖酶tb，将tb在大肠杆菌bl21和毕赤酵母gs115中进行表达并对表达产物的酶学性质进行分析比较。分析表明，融合蛋白tb最适ph值为6.0，最适温度为70℃，较xynb有大幅度的提高；在热稳定性方面，tb明显优于xynb,将两种稀释好的酶液分别在80℃和90℃下热处理3min，tb的热稳定性较xynb提高了6倍左右；tb的ph稳定性为5～9（相对剩余活性在50%以上的ph范围），较xynb有所下降，但两者的比活性基本不变，保持了亲本xynb的高比活性。通过同源建模和序列比较，分析了可能影响融合蛋白tb酶学性质的因素，为进一步研究木聚糖酶的结构与功能提供了新的思路。