代谢工程改善野生酵母利用木糖产乙醇的性能

从256个自然样品中筛选得到1株可高效转化d-木糖的酵母。通过生理生化和分子生物学方法鉴定,证实该菌株是属于candidatropicalis。以该酵母为研究对象,增加木糖醇脱氢酶表达量,通过改变代谢流以达到提高酒精产率的目的。以pxy212-xyl2质粒为基础载体,构建了含有潮霉素抗性的pyx212-xyl2-hygro,电击转化进入野生型c.tropicalis,潮霉素抗性筛选,得到含高拷贝木糖醇脱氢酶基因的重组菌株c.tropicalisxyl2-7。重组菌的比酶活达到0.5u/mgprotein,比原始菌株提高了3倍。实验表明,重组菌木糖醇得率比原始菌株降低了3倍,酒精得率提高了5倍。首次通过实验验证了热带假丝酵母利用木糖产乙醇的可行性,这对研究酵母利用秸秆、麦糠、谷壳等纤维质农业废弃物生产燃料乙醇具有重要启示。