d-氨基酸氧化酶与麦芽糖结合蛋白和透明颤菌血红蛋白的融合表达

d-氨基酸氧化酶(daao)是一种重要的工业酶。为了进一步提高daao在大肠杆菌中的可溶性和活性表达,分别构建了麦芽糖结合蛋白(mbp)和透明颤菌血红蛋白与三角酵母daao(tvdaao)的n-端融合蛋白。其中,mbp融合蛋白mbp-tvdaao在组成型(jm105/pmkc-daao)和诱导型菌株(jm105/pmkl-daao)中表达时,目标蛋白的可溶性表达量分别达到全细胞蛋白表达量的28%以上和17%左右,比无mbp融合的对照菌株bl21(de3)/pet-daao分别提高3.7和1.8倍;但其酶活水平显著下降。vhb融合蛋白vhb-tvdaao在重组菌bl21(de3)/pet-vdaao中摇瓶诱导表达时,daao酶活达到了3.24u/ml,比对照菌株bl21(de3)/pet-daao提高了约90%。