热玫瑰小双孢菌来源的丙酮酸磷酸双激酶的表达及应用

以热玫瑰小双孢菌基因组dna为模板,通过pcr扩增得到了编码ppdk的基因,将此基因片段插入到表达载体pet28a(+)中构建得到了重组表达质粒pet28a(+)-ppdk,将重组表达质粒pet28a(+)-ppdk转化到大肠杆菌bl21(de3)中,经过iptg诱导,重组菌成功表达了n端带有6-histag的重组ppdk。经sds-page分析,重组ppdk单体分子量为101kd。经过镍亲和层析和超滤后,重组ppdk蛋白基本达到电泳纯,并被成功应用于焦测序中。