中度嗜盐菌四氢嘧啶合成基因的克隆与功能分析

中度嗜盐菌bacillusalcalophilusdty1分离自晋西北黄土高原盐碱土壤,能够产生耐盐相关的相容性溶质四氢嘧啶。为了研究四氢嘧啶的功能,克隆了dty1菌株四氢嘧啶合成基因簇ectabc。ecta、ectb和ectc分别编码169、428和132个氨基酸的肽链,分别与b.haloduransc-125中的二氨基丁酸乙酰基转移酶(ecta)、二氨基丁酸氨基转移酶(ectb)、四氢嘧啶合成酶(ectc)同源性达59%、81%和81%。将携带该基因簇的4.0kb片段转入蜡质芽孢杆菌b.cereusz后,芽孢杆菌的耐盐度显著提高。hplc检测发现,在1.0%nacl浓度下,转化菌b.cereusz-e菌株生成70.1mg/g四氢嘧啶,而在5.0%的nacl浓度下四氢嘧啶的产量高达118.6mg/g,显著高于b.alcalophilusdty1的四氢嘧啶产量。而且随着盐浓度的提高,四氢嘧啶的合成量也随之提高。由此证明四氢嘧啶参与中度嗜盐菌重要的渗透调节,ectabc的表达受盐诱导。