阴离子交换晶胶层析分离质粒dna

质粒dna(pdna)作为重要的基因治疗药物载体，其广泛应用受纯度和产量的限制。为了获得高纯度的pdna，首先制备超大孔连续床晶胶基质，接枝二乙氨基乙基葡聚糖得到阴离子交换型晶胶介质；然后以puc19质粒为例，将目标质粒转化至大肠杆菌，培养收集，碱液裂解和离心；最后用阴离子交换型晶胶介质从离心上清液中一步法层析分离pdna。通过优化层析过程的ph值和洗脱条件，最终在ph值为6.6时，用0.5mol/l的nacl溶液洗脱，得到较高纯度的pdna。整个分离过程中不使用动物源性酶，也不需常规分离中的高毒试