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生物工程学报 1998
非洲爪蟾孵化酶的cdna结构及其部分生物化学特性的研究Keywords: 非洲爪蟾,孵化酶,xhe,cub重复区,uvs.2 Abstract: 以uvs.2为探针从第25期非洲爪蟾胚胎头背部的cdna文库中筛选出了一个1.8kb的孵化酶基因(xhe),其转录产物最早出现于第17期胚胎的头背部,在第30期转录量达到高峰,随后便逐渐减少。该基因含有编码514个氨基酸的一个开框阅读框架,含有信号肽和原酶序列。所推测出的成熟蛋白有425个氨基酸,包括位于n一端的含有200个氨基酸的金属蛋白酶序列和位于c端的两个各110个氨基酸的cub重复区。而uvs.2只代表该基因c端大约3/4的部分。同时还发现该酶分子量为60kda,是一种胰蛋白酶类型的金属蛋白酶。它很不稳定,在纯化过程中极易降解为40kda分子。60kda分子具有很强的卵黄膜溶解活性和蛋白酶活性。其中cub重复区很可能在介导卵黄膜和40kda分子中起着重要作用,而40kda分子很可能是在纯化操作过程中,由60kda分子发生降解或自身降解丢失了两个cub重复区而形成的,它只是60kda分子中的一个金属蛋白酶主功能区,所以它没有卵黄膜溶解活性,尽管仍具有很强的蛋白酶活性。
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