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生物工程学报 1998
利用恒溶氧.补料分批技术高密度培养大肠杆菌生产重组人骨形成蛋白-2aKeywords: 重组大肠杆菌,分批补料,高密度培养,人骨形成蛋白-2a(bmp-2a) Abstract: 对表达人骨形成蛋白-2a(bmp-2a)的重组大肠杆菌yk537/pdh-b2m在500ml摇瓶中进行了培养条件的摸索实验,继后用5l自控发酵罐进行分批培养和分批补料培养,以获取rhbmp-2a两种培养方式结果比较表明,在培养过程中保持30%~40%左右的溶解氧和限制性流加葡萄糖可以使bmp-2a的含量达到2.78g/l,最终菌体密度为od60053(相当于干菌21.2g/l),重组蛋白的表达量占菌体总蛋白的25%。该培养技术的关键是:(1)在培养过程中保持适当的溶解氧;(2)限制性流加葡萄糖;(3)42℃起始诱导的时间控制在对数生长中期,持续表达时间为4h;(4)细菌持续生长的比生长速率控制在0.3h-1左右。
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