青霉素g酰化酶操纵子的负调控因子的研究

青霉素g酰化酶(pa)操纵子的调节基因(pacr)存在于青霉素g酰化酶结构基因(pac)内部dral-taql一段约500bp的dna片段内，此片段内含有2个orf。2个orf及其突变体分别克隆到puc18得到一系列重组质粒，用这些重组质粒转化青霉素g酰化酶产生菌e.colid816，测定克隆片段对pa表达的影响。如果克隆片段含有具功能的pacr，诱导剂苯乙酸(paa)不能使由高拷贝却pacr表达的阻抑物全部失活，部分阻抑物结合pac操纵基因，阻碍rna聚合酶对pac的转录，因此pa的表达量降低。结果表明，阻抑物是由pac结构基因内部的orf2编码的蛋白因子，pacr即orf2。rna—dna杂交实验证实了pacr在转录水平阻抑pac的表达。