人肿瘤坏死因子及其突变体的基因工程下游工艺研究

研究了重组人肿瘤坏死因子(rhtnfα)及其突变体[lys2]-人肿瘤坏死因子[lys2]-rhtnfα)的基因工程下游工艺。rhtnfα和[lys2]-rbtnfα的温控表达工程菌株在b-btaune10型15l自控罐中经发酵每升可得50g湿菌体。rhtnfα和[lys2]-rhtnfα的表达水平仍能保持在50％以上，且表达产物为可溶性蛋白。所得菌体经超声破菌、硫酸铵沉淀，然后依次用deae—sepharoseff、cm-sepharoseff和sephacryls-200柱层析进行分离纯化，由每升发酵液菌体最终可得1g左右的纯品，纯度达到98％左右，rhtnfα的比活为～1.5×108iu／mg，[lys2]－rhtnα的比活为～6×108iu／mg。